Pengecatan Gram

         I.    Tujuan            : untuk membedakan antara bakteri yang bersifat gram positif dan gram  negatif

       II.    Prinsip            :

·         Gram positif : Bakteri mengikat kuat cat utama (gram A), tidak luntur    dengan peluntur (gram C), dan tidak mengikat kuat cat lawan (gram D) sehingga sel bakteri berwarna ungu.

·         Gram negatif : Bakteri tidak mengikat kuat cat utama (gram A), luntur oleh cat peluntur (gram c), dan mengikat kuat cat lawan (gram D), sehingga sel bakteri berwarna merah.

·         Sampel bakteri

·         Objek glass

·         Ohse bulat

·         Rak pengecatan

·         Mikroskop

·         Minyak imersi

A.    Pembuatan Preparat

1.      Siapkan objek glass bersih, kering, bebas lemak dan sterilkan diatas nyala api.

2.      Tulis kode sampel pada bagian belakang objek glass

3.      Sterilkan ohse diatas pembakar spirtus

4.      Homogenkan sampel, kemudian ambil 2-3 ohse sampel bakteri secara aseptis dan ratakan pada objek glass.

5.      Tunggu sampai kering lalu fiksasi 3x diatas pembakar spirtus

B.     Pengecatan

Bentuk                         : batang

Susunan                       : berderet

Warna sel                    : ungu

Cat                              : gram

Reaksi cat                    : gram positif

Organelle                     :           -

Warna organelle          :           -

Background                : merah muda

      VI.    Kesimpulan : Dalam sampel ditemukan bakteri bersifat gram positif berbentuk batang

    VII.    Pembahasan :

Pengecatan gram

Pengecatan ini mula-mula dikembangkan oleh ahli hitologi yaitu Christian Gram (1884).

Pengecatan gram meliputi 4 tingkatan :

1.      pemberian cat utama (larutan cat kristal violet, warnanya ungu)

2.      pengintensifan cat utama denganmenambahkan larutan mordan

3.      pencucian (dekolorisasi) dengan larutan alcohol

4.      pemberian cat penutup (cat lawan) dengan larutan cat safranin yang berwarna merah.